Circulating free DNA羥甲基化解決方案

項目介紹

參數

常見問題

應用案例

提供cfDNA羥甲基化解決方案

cfDNA (circulating-free cell DNA), 又稱循環 DNA 或無細胞DNA, 是指存在于血漿或血清的細胞外DNA；

ctDNA（circulating tumor DNA）攜帶了腫瘤基因組5hmC羥甲基化信息，

并且在最近幾年5hmC已經作為一種重要癌癥篩查標志物的研究，具有重要的臨床價值。

完整解決方案，服務每一個項目

艾斯基因專注表觀組學10年，提供專業的DNA羥甲基化整體解決方案；

已經完成1000+例樣本cfDNA羥甲基化項目經驗;

解決從血液采集保存、cfDNA分離提取(>90%得率)，

低至15ng輸入量的微量羥甲基化捕獲文庫構建，

全方位助力cfDNA羥甲基化biomarker篩選及轉化應用。

樣本要求

cfDNA樣本準備注意事項

在體內cfDNA在血漿里核酸酶的作用下，不斷降解消失，

同時新的ctDNA和cfDNA進入血漿中，維持一定的動態和半衰期；

抽血離體之后ctDNA會繼續降解、含量逐步減少，而來自白血細胞的cfDNA持續進去血漿，進而稀釋ctDNA濃度，降低檢測信號。

因此，在采血、血漿分離及保存運輸都會影響數據的質量

抽血及暫存注意事項
EDTA抗凝管	在2-8度冰箱暫放；在8小時內低溫離心分離血漿
Streck等采血管	在2-8度冰箱或者常溫暫放；在48小時內離心分離血漿
注意：全血樣本在分離出血漿之前，千萬不要冷凍保存
血漿分離
采取兩輪離心分離血漿，4℃條件下以 1600g 離心10min， 4℃條件下以 16000g 離心10min；要求EDTA抗凝管采血管需要低溫條件離心； Streck等采血管建議低溫離心，也可以常溫離心，不受到影響
保存及運輸
分離的血漿存放于-80℃冰箱保存(3年內都可以); 使用干冰運輸。
cfDNA提取產量
cfDNA的含量存在較大的波動及異質性；一般正常人及腫瘤早期, 5-15ng/ml血漿；腫瘤晚期或者化療等病人, cfDNA濃度顯著提高